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ELISA放大系統(tǒng)

   一,生物-親和素系統(tǒng)（Biotin-Avidin System,簡(jiǎn)稱BAS）

   生物素與抗生物素之間具有*的親和力,可以縮短反應(yīng)時(shí)間,達(dá)到快速檢測(cè)的目的.另外,抗體和酶的生物素標(biāo)記率高,又不影響其活性,每個(gè)親和素分子能結(jié)合4個(gè)生物素,每個(gè)生物素能標(biāo)記大量酶分子,使得ELISA的敏感性大大提高,生物素與親和素的結(jié)合也極為穩(wěn)定,不會(huì)在洗滌過(guò)程中脫落.BA-ELISA是在常規(guī)ELISA的基礎(chǔ)上,結(jié)全生物素（Biotin）與親和素（Avidin）的高度放大作用,形成的一種檢測(cè)方法.BA-ELISA分為:

1,LAB法即酶聯(lián)親和素-生物素標(biāo)記法（Labeled avidin-biotin,簡(jiǎn)稱LAB）.用辣根過(guò)氧化物酶直接標(biāo)記親和素,用生物素標(biāo)記第二抗體.

2,ABC法即酶聯(lián)親和素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物法（Avidin-Biotin-Peroxidase Complex,簡(jiǎn)稱ABC）.如用鏈霉親和素（Streptavidin）,則形成鏈霉親和素-酶聯(lián)生物素復(fù)合物（Streptavidin-Biotin-Peroxidaes Complex,簡(jiǎn)稱SABC）.在ABC法中,用生物素標(biāo)記第二抗體,又用生物素標(biāo)記過(guò)氧化物酶.在使用前30min,親和素與酶聯(lián)生物素以1:1的比例混勻.1個(gè)親和素分子結(jié)合3個(gè)生物素分子,親和素剩下的1個(gè)結(jié)合點(diǎn)與標(biāo)記第二抗體的生物素結(jié)合,親和素起橋聯(lián)作用.ABC法比PAP（Peroxidase-antiperoxidase tech-nique）法敏感幾十倍.

3,BAB法即酶聯(lián)親和素-生物素橋法（Bridged avidin-biotin,簡(jiǎn)稱BAB）.用游離親和素（或鏈霉親和素）作為橋聯(lián)劑,將生物素標(biāo)記后開(kāi)成的復(fù)合物與酶標(biāo)記生物素連結(jié)起來(lái),然后進(jìn)行樣品的檢測(cè).由于標(biāo)記抗體分子上連有多個(gè)生物素,因此,zui終形成的抗原-生物素標(biāo)記抗體-親和素-酶標(biāo)生物素復(fù)合物可積聚大量的酶分子;加入相應(yīng)底物后,產(chǎn)生強(qiáng)烈的酶促反應(yīng),大幅度提高檢測(cè)的靈敏度.