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Ig的水解片段
在一定條件下,Ig分子的某些部分可被蛋白酶分解為不同的片段,因此用酶水解免疫球蛋白是研究其結(jié)構(gòu)與功能的重要方法之一。免疫學(xué)中常用的酶是木瓜蛋白酶(Papain)和胃蛋白酶(Pepsin).
木瓜蛋白酶在生理?xiàng)l件下作用于H鏈?zhǔn)苟蜴?/span>N端裂解,生成兩個(gè)*相同的Fab段和一個(gè)Fc段。Fab段又稱(chēng)為抗原結(jié)合片段,是由一條完整的L鏈和部分H鏈組成,它仍能和抗原結(jié)合,但結(jié)合能力減弱,不能形成凝集反應(yīng)或沉淀反應(yīng)。Fc段為可結(jié)晶片段,為2條H鏈C端剩余的部分,分子量為55KDa,在低溫能夠結(jié)晶,無(wú)抗原結(jié)合活性,但具有其他生物活性如固定補(bǔ)體、親和細(xì)胞等。
胃蛋白酶在低pH下可在IgG分子H鏈間二硫鏈近羥基端斷裂H鏈,形成大小兩個(gè)片段大片段為F (ab’)2,由兩個(gè)F(ab)及鉸鏈區(qū)組成,為雙價(jià),仍具有抗體活性,可以與抗原發(fā)生結(jié)合形成沉淀或凝集反應(yīng)。小片段為Fc’片段,無(wú)生物學(xué)活性和抗原性,zui終被降解。